قيمة مضان الكشف عن الحمض النووي الكمي - معلمة الحب والكراهية

يستخدم "برنامج تشخيص وعلاج الالتهاب الرئوي الفيروسي التاجي الجديد (الإصدار التاسع التجريبي)" قيمة Ct للكشف عن الحمض النووي 35 كأحد الأسس المهمة لتحرير إدارة العزل أو التفريغ.إذن ، ما الذي تمثله قيمة Ct لمجموعة أدوات الكشف عن الحمض النووي؟هل قيم Ct لمجموعات مختلفة قابلة للمقارنة؟هل كلما انخفضت قيمة Ct ، كان أداء الطقم أفضل؟
قيمة Ct (دورة العتبة ، Ct) هي عدد دورات PCR عندما تتجاوز شدة إشارة التألق الكمي في الوقت الحقيقي العتبة المحددة.تأخذ مجموعات الكشف عن الحمض النووي التاج الجديد كمثال.من أجل نفس رد فعل نفس المجموعة للكشف عن عينتين محتويتين على الفيروس ، A و B ، يمثل حجم قيمة Ct ، إلى حد ما ، عدد نسخ الجين الفيروسي ، أي الحمل الفيروسي.كلما انخفض Ct للعينة B ، زاد الحمل الفيروسي.تتناسب قيمة Ct عكسًا مع الحمل الفيروسي وإصابته.لا يمكن الحكم على إيجابيات وسلبيات المجموعات الكمية المختلفة في الوقت الفعلي من خلال حجم قيمة Ct فقط ، لأن قيم Ct لمجموعات مختلفة غير قابلة للمقارنة.يجب قياس تقييم أداء المجموعة من جوانب الحساسية (الحد الأدنى للكشف) والنوعية والدقة والاستقرار والتطبيق التشخيصي.كل مصنع كاشف لديه ثمانية عشر نوعًا من فنون الدفاع عن النفس ، ولديهم قوى سحرية خاصة بهم في التطبيق ، لذلك لن أخوض في التفاصيل هنا.
بالنسبة لأدوات / أنظمة التحليل الكمي التقليدي في الوقت الحقيقي PCR (QPCR) ، فإن الحصول على قيم Ct واستخدامها على نطاق واسع في تطبيقات الكشف عن مسببات الأمراض أمر مألوف للجميع.مع تطور الصناعة وتقدم التكنولوجيا ، واجهت معدات وكواشف QPCR فرصًا وتحديات.قام Yiou Think Tank (تقرير بحثي لعام 2021 عن صناعة الاختبارات الجينية في الصين: التكنولوجيا) بتحليل أن معظم الشركات في صناعة QPCR في بلدي تواجه مشكلات مشتركة تعتمد على التكنولوجيا.استجابة لهذه المشاكل ، تنقسم الحلول بشكل أساسي إلى نوعين: تسريع تحسين التكنولوجيا ونشر تقنيات جديدة.
يعد اختبار نقطة الرعاية للتشخيص الجزيئي QPCR أحد اتجاهات التنمية في الصناعة ، ويعد تحسين الأداء عاملاً مهمًا لتسريع تطبيق التكنولوجيا.بالنسبة لمعدات الاختبار في نقطة الرعاية ذات معدل نقل عينة واحدة من QPCR ، كيف يمكن تحسين قيمة Ct للمعلمة الرئيسية لتفاعل فردي في البحث والتطوير؟نفس المعدات ونفس نظام التفاعل ونفس تركيز القالب ، نظريًا ، كلما زادت قيمة Ct لتفاعل واحد ، انخفضت كفاءة الإنزيم في التفاعل.
في عملية تحسين كفاءة تفاعل الإنزيم وتحسين قيمة Ct ، يمكن أولاً تحليل منحنى تضخيم كمي نموذجي لدورة 40 PCR.ينقسم منحنى التضخيم في الشكل أدناه إلى مرحلة خلفية مضان ، ومرحلة تضخيم أسي ، ومرحلة خطية ، ومرحلة هضبة.من أجل تحقيق خلفية مضان أقل ، إلى أقصى حد ممكن لتمييزها عن قيمة التألق للتضخيم الأسي المبكر ، من الضروري الاختبار من ناقل المواد الاستهلاكية للتفاعل ، وفحص تصميم المسبار التمهيدي ، ونظام المخزن المؤقت للتفاعل.فترة التضخيم الأسي هي أكثر تفاعل مباشر لنشاط الإنزيم ، وهي أيضًا دليل على التنسيق المثالي لمعدات الاختبارات في نقطة الرعاية وحاملات التفاعل والكواشف.في هذا الوقت ، يلزم تعديل واختبار التحكم في درجة حرارة المعدات ، واكتساب الإشارات الضوئية وتحليلها ، والتوافق الحيوي للناقل ، وأداء نظام الكواشف في جميع الجوانب.أخيرًا ، اكتمل التضخيم بالكامل ، ويجب تقديم النتائج بواسطة خوارزمية بيانات صارمة للحصول على قيمة Ct معقولة.

خطوة صغيرة في تحسين قيمة Ct هي الخطوات التي لا تعد ولا تحصى لموظفي البحث والتطوير.في قلق وإثارة النهار والليل ، في كل مرة "لا يمكن رؤية الجبال والأنهار ، والصفصاف مظلمة والأزهار مشرقة وهناك قرية أخرى" ، مما يمنحنا الشجاعة والعاطفة للمضي قدمًا تكرارا.